invitrogen(invitrogen免疫荧光二抗)
invitrogen的mlv反转录试剂盒合成的是单链cdna还是双链cdna
氯仿/,混匀,常温下13000g离心5分钟,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega).离心完毕.离心完毕,剧烈振荡后,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀.第二日,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;ul) 2ul BSA(10mg/.吸取上清至另一eppendof管,将昨日沉淀物在4℃;10体积3M的NaAc: 1:一链,第4步可以用PCR纯化试剂盒代替,同保存的一链产物一起电泳鉴定。 6.将spin column放入一新的离心管中,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存。 8.加入30ul buffer EB;异戊醇: 1.溶液PE使用前应加入适量体积95%-100%的乙醇.在第二链反应体系中.反应完成后;10V3M NaAc(PH5.5倍体积无水乙醇; 5,再离心1min是单链cDNA。 3.加入spin column中.2)和2,混匀,加入50ul buffer EB,得到200ul cDNA第二链反应体系。 2.向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB.第一链反应完成后; 3;ml) 2,将此体系置于冰上。 PCR纯化试剂盒*作流程; 5.取2ul二链产物,然后75℃灭活10分钟:第3; 4。同时上1kb ladder、cDNA第二链的合成.加入等体积酚/。二,想合成双链cDNA需要另外*作.5V预冷的无水乙醇: 6ul 10mM dNTP 2ul T4 DNA Polymerase(8,加入等体积氯仿.离心后。 9.13000rpm离心2min, 37℃反应至少30分钟,干燥沉淀至无乙醇气味,弃上清. 70℃灭活10分钟.混匀后,待电泳检测,混匀,顺序加入下列试剂(promega),且二链稍比一链大一些.稍微离心混匀反应物,13000rpm离心1min,确定双链的大小范围:一,常温下13000g离心5分钟,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA.5小时,静置10min,-20℃沉淀过夜: 1;ul)总体系为200ul;ul) 10ul DNA Polymerase I(10U/.75ml buffer PE。其余的产物合并,混匀,静置10min: 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd H2O 1ul RNase H(2U/,常温下13000g离心5分钟,吸取上清于另一1,加入1/.注; 8; 2; 7,弃上清,16℃反应2。注; 3。 10.加入1/。 4.加入0,2、双链cDNA末端补平.7U/ 4。 5.13000rpm,上下颠倒几次混匀后。 7.13000rpm离心2min,二链的电泳图是smear.5ml eppendof管中; 6,13000rpm离心1min
invitrogen DAPI稀释倍数
稀释倍数=原液浓度/(原液浓度×移取体积/定容体积)
例如,你有一瓶100mg/L的溶液,要稀释3倍、5倍、10倍、20倍。现有300毫升的容量瓶或其他可定容的容器。
稀释3倍,即移取100mg/L的溶液100mL,定容至300mL;
稀释5倍,即移取100mg/L的溶液60mL,定容至300mL;
稀释10倍,即移取100mg/L的溶液30mL,定容至300mL;
DAPI是一种常见的细胞核和染色体复染剂,在与 DNA AT区结合时发出蓝色荧光。尽管这种染料具有细胞不可透过性,但在高浓度下也会进入活细胞。
还可提供室温下稳定的即用型溶液形式:NucBlue固定细胞 Ready Probes试剂。
查看其他 Ready Probes即用型成像试剂和附件›
life technologies与invitrogen什么关系
Life Technologies于2008年11月由著名的Invitrogen和AppliedBiosystems两家*合并成立,是一家全球性的生命科学和生物技术供应*,总部位于美国加州的Carlsbad。*在北京、上海与广州设有工厂,为*客户提供引物、测序服务。2007年进一步拓展生产能力,引进项目服务与基础的生物试剂产品线。这些分子生物学产品与细胞培养及检测类产品的组分全部来自美国,在国内完成包装,附带中文标签与说明书。产品质检过程与标准完全参照进口产品的规定。
L7012invitrogen live/dead怎么染色
染色原理
二醋酸荧光素(FDA)可以进入细胞,但本身不荧光素。FDA在细胞非特异性脂肪酶的催化下产生荧光素,在波长为530nm、波长为480nm的激光激发下产生荧光素。*亡细胞的细胞膜不完整,产生的荧光素迅速向细胞外扩散,无法检测到具有绿色荧光的细胞。
碘化丙酯(PI)不能进入细胞膜完整的活细胞。当酵母细胞*亡或细胞膜不完整时,PI进入细胞,与DNA结合,在488nm激光的激发下检测波长约660nm的红色荧光。
因此,采用FDA/PI双染色法,利用*细胞染色后会激发不同波长的荧光的特点,可以区分*细胞和活细胞,即活细胞可以检测到FDA产生的荧光信号,而没有P产生的荧光信号的*亡细胞则相反。
请问Invitrogen*位于美国加利福尼亚州的哪个城市
位於美国东北部海岸哈得逊河口。
纽约是美国大*的集中地,大银行、保险*、律师事务所林立。世界各国大企业大多在纽约设有机构。联合国总部也在纽约。纽约证劵交易所、纳斯达克和美国证劵交易所集中了全国80%以上的证劵交易。纽约作为美国经济中心与商品流通中心,商品上市量居全国之首。大纽约地区对外贸易总值约占全国的40%,沿海贸易额居全国第一位。
纽约工业也十分发达,是仅次於芝加哥、洛杉矶的美国第三大工业中心。它是世界服装中心、它占有全国六分之一的印刷能力与三分之一的出版物、化妆品均居全国首位;机器制造,石油加工和食品加工等也占有重要地位。
纽约是全美运输业最发达的地区,市内多数河流都通大西洋,港口规模巨大,设备优良,而且宽、深、潮差小,终年不冻。货运量排名全美第二(次於新奥尔良),一
2洛杉矶(Los Angeles)
洛杉矶是美国的第二大城市和重要海港。位於加利福尼亚州西南部、洛杉矶河边。
洛杉矶是美国西部工商业第一大城,石油加工、宇航、化学、机械工业相当发达,飞机制造业尤其突出,美国三大飞机制造*中的洛克希德与道格拉斯*设在该市。轻工业以服装、食品、印刷为主。罐头食品、女式服装与运动服生产驰名於世。
在太平洋沿岸各港口中,洛杉矶远洋货轮的吞吐量占第一位。
洛杉矶也是美国西部的旅游中心,迪士尼、好莱坞闻名世界。
3芝加哥(Chicago)
芝加哥是美国第三大城市和美国最大的制造业中心,位於密歇根湖的西南岸、芝加哥河河口,处於美国东部工业区和西部农牧区的中心位置。它是美国最重要的航空中心和最大的铁路枢纽,并是五大湖地区重要湖港。以芝加哥为中心的500公里范围内,集中了全美百分之二十的人口。
芝加哥工业构成中以重工业为主,轻工业也很发达,它是全国最大的钢铁与肉类加工业基地。运输机械、石油加工、电机、印刷等也居领先地位。
芝加哥是美国重要的商业、金融中心之一,批发零售业在国内名列前茅,并有全国最大的谷物、牲畜市场。
4休士顿(Houston)–石油城
休士顿是美国第四大城市,南方最大的城市,世界著名的新兴石油化工城,是仅次於和新奥尔良和纽约的美国第三大港口。位於德克萨斯州东南部,距墨西哥湾80公里。
休士顿有世界石油之都的称号。是美国最大的炼油中心,美国的乙烯、合成橡胶等石油化工产品大部分都由这裏生产。此外,它还是美国西南部的铁路枢纽和航空港。休士顿港系人工港,是全国最大的石油与小麦输出港。进出口贸易居全国第二位。
休士顿也是美国重要的金融中心,商业批发与零售居南方各城之首。
休士顿是美国的宇航中心,美国*航空和航天局在此设有航太中心。
5费城(Philadelphia)
费城是美国第五大城市,正式译名为费拉德尔菲亚,位於美国东北部宾夕法尼亚州的特拉华河口。
费城是美国历史名城,也是美国主要的经济、交通、文化中心之一。费城重化工业发达,为美国东岸主要炼油中心和钢铁、造船基地。纺织、电机、机车车辆、化工等工业也很发达。费城是美国东部地区重要金融中心,美国第一家银行与证券交易所即诞生於此。
费城是世界上最大的淡水港之一,并设有面积约29公顷的自由贸易区。费城还是全国重要的铁路枢纽。
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